مجله دانشکده دندان‌پزشکی اصفهان

مقایسه‌ی اثر پلاسماهای غنی از فیبرین پیشرفته با لکوسیت‌دار در میزان چسبندگی فیبروبلاستی روی غشای کلاژنی

نوع مقاله : مقاله‌های پژوهشی

چکیده

مقدمه: حضور فاکتورهای رشدی و سایتوکین‌ها در پلاکت‌ها، نقش کلیدی در التهاب و ترمیم زخم‌ها دارند. از این‌رو Advanced-platelet rich fibrin و Leukocyte-platelet rich fibrin  به عنوان محصولات پلاکتی در درمان‌های پریودنتال مورد استفاده قرار می‌گیرند. این مطالعه با هدف مقایسه‌ی اثر L-PRF و A-PRF بر روی میزان چسبندگی فیبروبلاست‌های لثه‌ای بر روی غشای کلاژنی انجام شد.
‎مواد و روش‌ها: در این مطالعه‌ی تجربی- آزمایشگاهی (in vitro) که در زمستان 1399 در مرکز ذخایر ژنتیکی ایران انجام شد، غشاء به پنج قطعه 5×5 میلی‌متری تبدیل و در ته چاهک یک محیط کشت 5 چاهکی قرار داده شد. یک میلی‌لیتر A-PRF به دو چاهک و به دو چاهک دیگر نیز حجم وزنی مشابه A-PRF، از ماده‌ی L-PRF اضافه گردید. به طور کلی در مطالعه، 5 گروه اصلی (4 گروه آزمون و یک گروه شاهد) در نظر گرفته شد و در هر گروه، 6 نمونه و در مجموع 30 نمونه جهت تصویربرداری انتخاب گردید. به هر کدام از گروه‌ها، تعداد 104 سلول فیبروبلاست اضافه شد. چسبندگی سلولی توسط میکروسکوپ الکترونی پس از 24 ساعت از فیکساسیون بررسی شد. میزان چسبندگی با استفاده از آزمون‌های آماری ANOVA و Scheffe با سطح معنی‌داری (0/001 > p value) آنالیز گردید.
‎یافته‌ها: آزمون ANOVA اختلاف معنی‌داری بین میانگین تعداد فیبروبلاست‌های لثه‌ای چسبیده به غشا کلاژنی در حضور A-PRF، L-PRF (به ترتیب با میانگین 12/50 و 13/75) و گروه شاهد (با میانگین 4/67) نشان داد (0/001 > p value). بر اساس نتایج آزمون Scheffe، میانگین تعداد فیبروبلاست‌های لثه‌ای چسبیده به غشاء کلاژنی در حضور A-PRF و L-PRF اختلاف معنی‌داری از لحاظ آماری نداشت (0/05 < p value).
‎نتیجه‌گیری: افزودن لخته‌ی فیبرینی منجر به افزایش چسبندگی سلول‌های فیبروبلاست می‌شود هرچند از لحاظ آماری تفاوت معنی‌داری بین A-PRF و L-PRF در چسبندگی سلول‌های فیبروبلاست وجود نداشت.
‎کلیدواژه‌ها: غشاها؛ فیبرین غنی از پلاکت؛ فیبروبلاست‌ها

عنوان مقاله [English]

Comparison between the effect of A-PRF and L-PRF on the number of fibroblasts adhered to collagen membrane

چکیده [English]

Introduction: Growth factors and cytokines in the platelet play a major role in the progression of inflammation and healing processes, therefore A-PRF and L-PRF as platelet drive ingredients are widely used in periodontal treatments. The purpose of this study is to compare the effect of A-PRF and L-PRF on the number of gingival fibroblasts adhered to collagen membrane.
Materials and Methods: In this In-vitro study conducted in winter of 2021 at the Iranian biological resource center, the membrane was cut into five pieces (5x5 mm) and placed at the bottom of a 5 well plate. 1 milliiiter of (A-PRF) was added to two wells in each group. And a similar amount of L-PRF was added to two wells in the other two groups. The last well was left A-PRF or L-PRF free. Gingival fibroblasts were seeded in all the wells. Cell adhesion was evaluated by means of a Field Emission Scanning Electron Microscope after 24 hours of incubation. The Data were analyzed by, one way and two-way ANOVA and Scheffe test (p value < 0.001).
Results: Based on ANOVA there was a statistically significant difference In the A-PRF + group and L-PRF+ group (12.50 and 13.57) compared to the control group (4.67) (p value < 0.001).and Scheffe analysis showed no statistically significant difference between A-PRF+ or L-PRF+ groups (p value = 0.307).
Conclusion: A-PRF and L-PRF are both effective in the adhesion of fibroblasts cells to collagen membranes, although there is no difference between A-PRF and L-PRF in the adhesion of fibroblast cells to collagen membranes.
Keywords: Guided Tissue Regeneration; collagen membrane; Cell Adhesion; PRF; fibroblast

1- Wang HL, Miyauchi M, Takata T. Initial attachment of osteoblasts to various guided bone regeneration membranes: an in vitro study. J Periodontal Res 2002; 37(5): 340-4.
2- Hammerle CHF. Membranes and bone substitutes in guided bone regeneration. In: Lang NP, Karring T, Lindhe J, editor. Proceedings of the 3rd European Workshop on Periodontology. 1st ed. Berlin, Germany: Quintessenz Verlags-Gmbh; 1999. p. 468-99.
3- Melcher AH. On the repair potential of periodontal tissues. J Periodontol 1976; 47(5): 256-60.
4- Nyman S, Gottlow J, Karring T, Lindhe J. The regenerative potential of the periodontal ligament. An experimental study in the monkey. J Clin Periodontol 1982; 9(3): 257-65.
5- Rodrigues AZ, Oliveira PT, Novaes Jr AB, Maia LP, Souza SL, Palioto DB. Evaluation of in vitro human gingival fibroblast seeding on Acellular Dermal Matrix. Braz Dent J 2010; 21(3): 179-89.
6- Erdag G, Sheridan RL. Fibroblasts improve performance of cultured composite skin substitutes on athymic mice. Burns 2004; 30(4): 322-8.
7- Lindhe J, Westfelt E, Nyman S, Socransky SS, Haffajee AD. Long-term effect of surgical/non-surgical treatment of periodontal disease. J Clin Periodontol 1984; 11(7): 448-58.
8- Christan C, Dietrich T, Hägewald S, Kage A, Bernimoulin JP. White blood cell in generalized aggressive periodontitis after non-surgical therapy. J Clin Periodontol 2002; 29(3): 201-6.
9- Purucker P, Mertes H, Goodson JM, Bernimoulin JP. Local versus systemic adjunctive antibiotic therapy in 28 oatients with generalized aggressive periodontitis. J Periodontol 2001; 72(9): 1241-5.
10- Masuki H, Okudera T, Watanebe T, Suzuki M, Nishiyama K, Okudera H. Growth factor and pro-inflammatory cytokine contents in platelet-rich plasma (PRP), plasma rich in growth factors (PRGF), advanced platelet-rich fibrin (A-PRF), and concentrated growth factors (CGF). Int J Implant Dent 2016; 2(1): 19.
11- Panda S, Sankari M, Satpathy A, Jayakumar D, Mozzati M, Mortellaro C, et al. Adjunctive Effect of Autologus Platelet-Rich Fibrin to Barrier Membrane in the Treatment of Periodontal Intrabony Defects. J Craniofac Surg 2016; 27(3): 691-6.
12- Caton JG, DeFuria EL, Polson AM, Nyman S. Periodontal regeneration via selective cell repopulation. J Periodontol 1987; 58(8): 546-52.
13- Gentile P, Chiono V, Tonda-Turo C, Ferreira AM, Ciardelli G. Polymeric membranes for guided bone regeneration. Biotechnol J 2011; 6(10): 1187-97.
14- Whitman DH, Berry RL, Green DM. Platelet gel: an autologous alternative to fibrin glue with applications in oral and maxillofacial surgery. J Oral Maxillofac Surg1997; 55(11): 1294-9.
15- Choukroun J, Adda F, Schoeffler C, Vervelle A. Une opportunite en paro-implantologie: le PRF. Implantodontie 2001; 42: 55-62.
16- Lindhe J, Karring T, Araújo M. Anatomy. In: Lang NP, Lindhe J, editors. Clinical periodontology and implant dentistry. 6th ed. Hoboken, NJ: John Wiley & Sons; 2015. p. 19.
17- Rios HF, Bashutski JD, Giannobile WV. Bone as a living organ. In: Lang NP, Lindhe J, editors. Clinical periodontology and implant dentistry. 6th ed. Hoboken, NJ: John Wiley & Sons; 2015.
18- Ghanaati S, Booms P, Orlowska A, Kubesch A, Lorenz J, Rutkowski J, et al. Advanced platelet-rich fibrin: a new concept for cell-based tissue engineering by means of inflammatory cells. J Oral Implantol 2014; 40(6): 679-89.
19- Esfahrood ZR, Talebi Ardakani M, Shokri M, Shokri M. Effects of leukocyte–platelet-rich fibrin and advanced platelet-rich fibrin on the viability and migration of human gingival fibroblasts. J Indian Soc Periodontoil 2020; 24(1): 15-9.
20- Schär MO, Diaz-Romero J, Kohl S, Zumstein MA, Nesic D. Platelet-rich concentrates differentially release growth factors and induce cell migration in vitro .Clin Orthop Relat Res 2015; 473(5): 1635-43.
21- Amid R et al. Assessment of gingival fibroblast attachment to root surfaces restored with three different dental materials: An in vitro study. J Periodontal Implant Dent 2016; 8(1): 24-32.
22- Babay N. Attachment of human gingival fibroblasts to periodontally involved root surface following scaling and or etching procedures: A scanning electron microscopy study. Braz Dent J 2001; 12(1): 17-21.
23- Takata T, Wang HL, Miyauchi M. Attachment, proliferation and differentiation of periodontal ligament cells on various guided tissue regeneration membranes. J Periodontol Res 2001; 36(5): 322-7.
24- Hurley LA, Stinchfield FE, Bassett AL, Lyon WH. The role of soft tissues in osteogenesis. An experimental study of canine spine fusions. J Bone Joint Surg Am 1959; 41(7): 1243-54.
25- Burridge K, Molony L, Kelly T. Adhesion plaques: sites of transmembrane interaction between the extracellular matrix and the actin cytoskeleton. J Cell Sci Suppl 1987; 8: 211-29.
26- Vahabi S, Yadegary Z, Karamshahi M. Evaluating the adhesion of human gingival fibroblasts and MG-63 osteoblast-like cells to activated PRP-coated membranes. Cell Tissue Bank 2019; 20(3): 339-49.
27- Döri F, Huszar T, Nikolidakis D, Arweiler NB, Gera I, Sculean A. Effect of platelet‐rich plasma on the healing of intra‐bony defects treated with a natural bone mineral and a collagen membrane. J Clin Periodontol 2007; 34(3): 254-61.
28- Kasaj A, Reichert C, Götz H, Röhrig B, Smeets R, Willershausen B. In vitro evaluation of various bioabsorbable and nonresorbable barrier membranes for guided tissue regeneration. Head Face Med 2008; 4: 22.
29- Newsome DA. In vitro stimulation of cartilage in embryonic chick neural crest cells by products ofretinal pigmented epithelium. Dev Biol 1976; 49(2): 496-507.
30- Gospodarowicz D, Greenburg G, Birdwell CR. Determination of cellular shape by the extracellular matrix and its correlation with the control of cellular growth. Cancer Res 1978; 38(11 Pt 2): 4155-4171.
31- Vaheri A, Mosher DF. High molecular weight, cell surface-associated glycoprotein (fibronectin) lost in malignant transformation. Biochim Biophys Acta 1978; 516(1): 1-25.
32- Vaheri A, Ruoslahti B, Mosher DF. Fibroblast surface protein. New York, NY: New York Academy of Sciences; 1978.
33- Pitzurra L, Jansen IDC, de Vries TJ, Hoogenkamp MA, Loos BG. Effects of L-PRF and A-PRF+ on periodontal fibroblasts in in vitro wound healing experiments. J Periodontal Res 2020; 55(2): 287-95.
34- Abbas AM, Alnumay SH, Bede SY. Evaluation of the effectiveness of using platelet rich fibrin (PRF) as a sole grafting material and membrane in augmentation of dehiscence and fenestration defects encountered during dental implant surgery. J Baghdad Coll Dent 2019; 31(2): 44-51.
مجله دانشکده دندان‌پزشکی اصفهان
دوره 19، شماره 1 - شماره پیاپی 1
خرداد 1402
صفحه 9-19